薏仁（Coix seed）又名薏苡仁、苡米、苡仁等，在河北、陕西、河南等地区产量丰富，被称为“世界禾本科植物之王”［1］。薏仁中含人体所需的亮氨酸、精氨酸等必需氨基酸以及矿物质［2］，且薏仁中的薏八醇及β、γ两种谷甾醇具有很高的药用价值，这也是薏米具有防癌作用的秘密所在［3］。薏米淀粉糊性质稳定，沉降速度较缓慢，较之其他淀粉类的成品不易老化［4］。薏仁不饱和脂肪酸含量较高，且含有具有抗氧化性很强的奇数碳链脂肪酸，具有减轻血液中超量胆固醇、加大细胞膜透性、阻遏心肌组织与动脉硬化等功能［5］。薏仁多糖是薏仁的主要有效成分之一，徐梓辉等［6］运用四氧嘧啶破坏胰岛细胞，建立了糖尿病小鼠的模型，研究发现薏仁多糖对阻遏肝糖原分解、肌糖原酵解和抑制糖异生具有一定效用，由此达到降低血糖浓度的作用［6］。植物多糖有许多药理作用如免疫调节、抗肿瘤作用［7-13］，降血糖、血脂作用［14-17］，抗辐射、抗菌、抗病毒作用［18-20］，抗氧化、抗衰老作用［21-23］等。本研究旨在通过对薏仁的水提、发酵试验，优化薏仁多糖的提取条件，以达到对薏仁的充分利用。同时，研究其抗氧化性，并通过透皮吸收实验，对发酵与水提多糖的透皮吸收效果进行比较，为其在人体抗衰老及透皮吸收中的应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

鼠皮购自北京海淀区兴隆实验动物养殖厂，薏仁为市售；维生素C购自国药集团化学有限公司；Tris碱、浓 HCL、硫酸、苯酚、葡萄糖、DPPH、焦性没食子酸购自北京化工厂。

BS2202S型电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；RJ-TGL-16B型离心机（无锡市瑞江分析仪器有限公司）；T6新世纪型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限公司）；DSHZ-300型恒温水浴振荡器（江苏省太仓市实验设备厂）；型电热恒温水浴锅（北京长安科学仪器厂）；YT-CJ-1ND型超净工作台（北京亚泰科隆仪器技术公司）；HC-268型透皮扩散池（天津正通科技有限公司）；A2492型分析天平（北京福海科技技术有限公司）；HH·SY21-Ni4型恒温水浴锅（北京精科华瑞仪器有限公司）。

1.2 试验方法

1.2.1 薏仁多糖提取工艺 热水浸提法：薏仁粉碎后过40目筛，热水浸提，以1 800 r/min的转速离心10 min后量取上清液；微生物发酵法：取乳酸菌/酵母菌进行菌种活化，待菌种生长至对数期，取200 μL菌液进行接种，发酵提取，并在 121℃下灭菌 30 min，1 800 r/min离心10 min后量取上清液。

1.2.2 薏仁多糖样品含量测定 多糖含量的测定参考文献［24］。

1.2.3 水提薏仁多糖的单因素探究 料液比对提取率的影响：提取温度80℃，时间6 h，pH 5。选取5个液料比梯度 0.050、0.075、0.100、0.125、0.150（g/mL），取一定量的多糖溶液测定多糖含量，从而得到提取率。

温度对提取率的影响：料液比 0.1（g/mL），pH 5，时 间 6 h，选 取 5 个温 度梯度 50、60、70、80、90℃。取一定量的多糖溶液测定多糖含量，从而得到提取率。

pH对提取率的影响：料液比0.1（g/mL），提取温度 80 ℃，时间 6 h，选取 5 个 pH 梯度 4、5、6、7、8。取一定量的多糖溶液测定多糖含量，从而得到提取率。

提取时间对提取率的影响：料液比0.1（g/mL），提取温度 80℃，pH 5。选取5个时间梯度2、4、6、8、10 h。取一定量的多糖溶液测定多糖含量，从而得到提取率。

薏仁多糖提取率=薏仁多糖浓度×提取液总体积/薏仁干重×100%

正交试验设计：在单因素优化的基础上进行正交试验，采用三因素三水平法进行设计，以确定提取多糖的最佳工艺（表1）。

表1 水提法正交试验因素与水平水平 因素时间（C）//h 1 2 3料液比（A）//g/mL 0.09 0.1 0.11温度（B）//℃85 90 95 5 6 7

1.2.4 发酵法提取薏仁多糖的单因素探究 菌种对提取率的影响：料液比0.1（g/mL），时间36 h。乳酸菌：温度 37℃，pH 6.5；酵母菌：温度 28℃，pH 5.0。取一定量的多糖溶液测定多糖含量，从而得到提取率。

料液比对提取率的影响：时间36 h，pH 5.0（酵母菌）和 6.5（乳酸菌）。料液比梯度 0.050、0.075、0.100、0.125、0.150（g/mL）。取一定量的多糖溶液测定多糖含量，从而得到提取率。

提取时间对提取率的影响：料液比0.1（g/mL），pH 5.0（酵母菌）和 6.5（乳酸菌）。时间梯度 12、24、36、48、60 h。取一定量的多糖溶液测定多糖量，从而得到提取率。

pH对提取率的影响：料液比0.1 g/mL，时间36 h。pH 梯度 4、5、6、7、8。取一定量的 多糖溶液测定多糖含量，从而得到提取率。

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